白腐菌Phanerochaete sordida YK 624产锰过氧化物酶的生产及初步纯化

    白腐菌Phanerochaete sordida YK 624产锰过氧化物酶的生产及初步纯化
    谢慧芳，近藤隆一郎，李忠正

    摘要：利用白腐菌Phanerochaete sordida YK624（ATCC 90872），采用Kirk液体培养基在富氧条件下进行振动培养，可得到锰过氧化物酶（MnP）活性较高和漆酶活性微量的酶液。该酶液通过超滤、透析、二乙氨基乙基琼脂糖凝胶（DEAEsepharose CL6B，pharmacia）离子交换柱层析的方法进行初步纯化后，得到比活性很高（1941.54IU/mg）的MnP酶液。漆酶活性和MnP活性比值的变化、SDSPAGE凝胶电泳试验和406nm附近的吸光值变化均表明，经离子交换柱层析后的YK1部分是主要的MnP，电泳试验同时表明纯化后的主要MnP的分子质量约为43kDa。经超滤、透析、离子交换柱层析纯化后得到的酶液YK1可用于进一步地研究及应用。
    关键词：锰过氧化物酶；液体培养；离子交换柱层析
    中图分类号：Q554.6； TS743.14
    文献标识码：A
    文章编号：0253-2417(2003)04-0022-05
    作者简介：谢慧芳（南京林业大学化工学院；江苏南京 210037）
              近藤隆一郎（九州大学农学部；日本九州福冈81281）
              李忠正（南京林业大学化工学院；江苏南京 210037）