黑曲霉发酵豆渣产酸性β-葡萄糖苷酶及其水解京尼平苷的性质

王剑锋，徐 琼，肖志强，余奇峰，钱皇辉，熊飞飞
（东华理工大学　生物系，江西抚州344000）

　　摘　要：利用单因素、正交试验考察了黑曲霉L菌株发酵豆渣产β-葡萄糖苷酶的条件和酶解京尼平苷的特性。结果表明：2 %豆渣适宜作为实验菌株液体发酵产酶培养基，当培养基中接种孢子浓度大于每毫升2×105个时，菌株产酶受发酵温度、装液量的影响显著，而不受接种量、摇床转速的影响，培养基初始pH值1.5时，菌株仍能正常产酶；优化的产酶培养基组成为豆渣1%、米糠1% 和Tween80 0.1%，初始pH值5.5；菌株在发酵温度28℃、装液量50mL（250mL摇瓶）、摇床转速150r/min 的发酵条件下发酵120h，发酵液酶活为（200±10）U/mL。所产β-葡萄糖苷酶水解京尼平苷的最适温度为55℃、最适pH值2.5、最佳水解时间15min；在该条件下酶的表观米氏常数（Km）为1.35g/L，最大水解速率（Vmax）为26.45g/(L•min•mg)，酶活半衰期为15min，50℃时大于60min；酶的水解活性受Na+、Ca2+的显著激活，受Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Hg+、Zn2+、Mn2+等离子（10mmol/L）和葡萄糖、乙醇的抑制。

　　关键词：β-葡萄糖苷酶；豆渣；对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷；京尼平；黑曲霉

　　中图分类号：TQ351

　　文献标识码：A

　　文章编号：0253-2417（2011）01-0035-06