里氏木霉β-木糖苷酶的分离纯化、酶学性质及水解机理研究

 　　江小华，朱均均，余世袁，勇强*

　　(南京林业大学 化学工程学院，江苏 南京 210037)

　　摘 要：通过硫酸铵沉淀、超滤脱盐、离子交换层析、凝胶过滤层析等手段，从里氏木霉(Trichoderma reesei)Rut C-30木聚糖酶粗酶液中分离纯化得到分子质量110.8 ku、比活力为61.99 IU/mg的电泳纯β-木糖苷酶。酶学性质研究结果表明：该酶反应以温度60 ℃、pH值3.5为宜，在60 ℃以下、pH值3.0～8.0酶活性稳定，且该酶作用于对硝基苯基-β-D-木糖苷的Km值和Vmax值分别为0.29 μmol/mL和169.99 IU/mg。酶水解机理研究结果表明，该酶从低聚木糖的非还原性末端切断β-1，4-糖苷键释放出木糖，其最适作用底物是短链的低聚木糖，随着低聚木糖碳链的增长，酶作用效率逐渐下降，而对木聚糖几乎不降解。

　　关键词：里氏木霉;β-木糖苷酶;分离纯化;酶水解

　　中图分类号：TQ35 文献标识码：A 文章编号：1673-5854(2013)01-0027-06