张宁，蒋剑春*，杨静，卫民，赵剑，童娅娟
（中国林业科学研究院 林产化学工业研究所； 生物质化学利用国家工程实验室； 国家林业局 林产化学工程重点开放性实验室； 江苏省 生物质能源与材料重点实验室，江苏 南京 210042）
摘 要：应用低能氮离子（N+）注入技术对纤维素酶产生菌里氏木霉（Trichoderma reesei）进行诱变选育，在能量为 10 keV，注量为150×1014和200×1014 N+/cm2的条件下分别筛选得到3株纤维素酶高产菌株，连续5代遗传稳定性实验结果表明，所得到的高产菌株遗传稳定性较好，羧甲基纤维素酶活力均提高到3.300 IU/mL 以上，较出发菌株 （2.698 IU/mL） 提高了20.0%以上。采用Plackett-Burman实验设计法和旋转中心组合设计法系统地研究高产菌株 150-1-1 发酵营养因子组成，得到了纤维素酶产量随葡萄糖、麸皮和微晶纤维素等营养因子的变化规律及相应的响应面分析图。实验结果表明，葡萄糖、麸皮和微晶纤维素浓度与纤维素酶活存在显着的相关性，当葡萄糖浓度为4.9 g/L，麸皮浓度为23.0 g/L，微晶纤维素浓度为7.7 g/L时，150-1-1纤维素酶滤纸酶活力达到2.439 IU/mL，较优化前 （2.000 IU/mL） 提高了22.0%。
关键词：N+离子注入；里氏木霉；纤维素酶
中图分类号：TQ352;Q815 文献标识码：A 文章编号：1673-5854（2014）04-0028-07
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