脂肪酶产生菌微波-亚硝基胍复合诱变及培养条件优化

《林产化学与工业》2013年5期
2013-11-01
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苗长林1,罗文1,吕鹏梅1*,李惠文1,杨玲梅1,袁振宏1,蒋剑春2

(1. 中国科学院 广州能源研究所,中国科学院可再生能源与天然气水合物重点实验室,广东 广州 510640;2. 中国林业科学研究院 林产化学工业研究所,江苏 南京 210042)

  摘 要:采用微波-亚硝基胍诱变方法对粗酶活为 10 U/mL 的米黑根毛霉进行诱变处理以获得高产酶能力的菌株,实验获得最佳诱变条件为:功率 500 W 微波处理时间为 100 s,亚硝基胍处理时间为 45 min。通过荧光圈初筛和摇瓶复筛,筛选出一株酶活可达 20.50 U/mL 突变菌株,该菌株比原始出发菌株脂肪酶活力提高了 105%,将MN4连续传代5次,酶活稳定。对MN4突变菌株的产酶条件进行研究,结果表明,MN4突变菌株最适产酶条件为:发酵温度 30℃,起始pH值为7.0,发酵时间 4 d。在此条件下,该突变菌株所产脂肪酶活最高,达 22.90 U/mL,产酶活力相对原始出发菌株提高了 129.0%。试验结果表明:微波、亚硝基胍对米黑根毛霉菌体细胞的致死作用表现出相似的趋势,在一定范围内都与诱变时间呈线性正相关。微波-亚硝基胍复合处理还呈现一定的协同效应,可以减弱单一诱变剂反复诱变产生的诱变抗性和饱和性,能够实现优势互补,提高诱变效率。

  关键词:脂肪酶;微波;亚硝基胍;诱变;米黑根毛霉

  中图分类号:TQ35;Q55 文献标识码:A 文章编号:0253-2417(2013)05-0030-05


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